Toutes les études microbiologiques, biochimiques et biologiques moléculaires des microorganismes sont réalisées dans des laboratoires spéciaux dont la structure et l'équipement dépendent des objets d'étude (bactéries, virus, champignons, protozoaires), ainsi que de leur orientation cible (recherche scientifique, diagnostic de maladies) ... L'étude de la réponse immunitaire et le sérodiagnostic des maladies humaines et animales sont réalisés dans des laboratoires d'immunologie et de sérologie (sérum).

Les laboratoires bactériologiques, virologiques, mycologiques et sérologiques (immunologiques) font partie des stations sanitaires et épidémiologiques (SES), des centres de diagnostic et des grands hôpitaux. Dans les laboratoires SES, des analyses bactériologiques, virologiques et sérologiques des matériaux reçus des patients et des personnes en contact avec eux sont effectuées, des bactéries porteuses sont examinées et des études sanitaires et microbiologiques de l'eau, de l'air, du sol, des produits alimentaires, etc.

Dans les laboratoires bactériologiques et sérologiques des hôpitaux et des centres de diagnostic, des recherches sont effectuées pour diagnostiquer les maladies intestinales, purulentes, respiratoires et autres maladies infectieuses, et un contrôle microbiologique de la stérilisation et de la désinfection est effectué.

Le diagnostic des infections particulièrement dangereuses (peste, tularémie, anthrax, etc.) est effectué dans des laboratoires à régime spécial, dont l'organisation et la procédure sont strictement réglementées.

Les laboratoires virologiques diagnostiquent les maladies causées par des virus (grippe, hépatite, poliomyélite, etc.), certaines bactéries - chlamydia(psittacose, etc.) et rickettsie(typhus, fièvre Q, etc.). Lors de l'organisation et de l'équipement des laboratoires de virologie, les spécificités du travail avec des virus, des cultures cellulaires et des embryons de poulet, qui nécessitent la plus stricte asepsie, sont prises en compte.

Dans les laboratoires mycologiques, ils diagnostiquent les maladies causées par des champignons pathogènes, agents pathogènes des mycoses.

Les laboratoires sont généralement situés dans plusieurs pièces, dont la superficie est déterminée par le volume de travail et le but.

Chaque laboratoire fournit:

a) des boîtes pour travailler avec des groupes distincts d'agents pathogènes;

b) salles d'études sérologiques;

c) locaux pour laver et stériliser la vaisselle, préparés
lessivage des milieux nutritifs;

d) vivarium avec boîtes pour animaux sains et expérimentaux
New York;

e) registre de réception et de diffusion des analyses.

En plus de ces salles, les laboratoires virologiques disposent de boîtes pour un traitement spécial du matériel d'essai et travaillent avec des cultures cellulaires.

Matériel de laboratoire microbiologique

Les laboratoires sont équipés d'un certain nombre d'instruments et d'appareils obligatoires.

1. Appareils de microscopie: microscope à immersion biologique avec accessoires supplémentaires (illuminateur, dispositif de contraste de phase, condenseur de champ noir, etc.), microscope à fluorescence.

2. Thermostats et réfrigérateurs.

3. Dispositifs pour la préparation de milieux nutritifs, solutions, etc.: appareils pour obtenir de l'eau distillée (distillateur), balances techniques et analytiques, pH-mètres, équipements de filtration, bains-marie, centrifugeuses.

4. Un ensemble d'outils pour manipuler les microbes: boucles bactériologiques, spatules, aiguilles, pincettes, etc.

5. Verrerie de laboratoire: tubes à essai, flacons, boîtes de Pétri, matelas, flacons, ampoules, Pasteur et pipettes graduées, etc., un appareil pour la fabrication de tubes de gaze de coton.

Les grands complexes de diagnostic ont des analyseurs automatiques et un système informatisé pour évaluer les informations reçues.

Dans le laboratoire, une place est réservée pour la coloration des préparations microscopiques, où se trouvent des solutions de colorants spéciaux, d'alcool, d'acides, de papier filtre, etc. Chaque lieu de travail est équipé d'un brûleur à gaz ou d'une lampe à alcool et d'un récipient contenant une solution désinfectante. Pour le travail quotidien, le laboratoire doit disposer des milieux nutritifs, réactifs chimiques, préparations diagnostiques et autres matériels nécessaires.

Les grands laboratoires ont salles thermostatiques pour la culture de masse de micro-organismes, mise en place de réactions sérologiques. Pour la culture, le stockage des cultures, la stérilisation de la verrerie de laboratoire et à d'autres fins, utilisez l'équipement suivant.

1. Thermostat.Un appareil qui maintient une température constante. La température optimale pour la reproduction de la plupart des microorganismes pathogènes est de 37 "C. Les thermostats sont à air et à eau.

2. Microanaérostat.Appareil pour cultiver des micro-organismes dans des conditions anaérobies.

3. Incubateur C0 2.Appareil pour créer une température et une atmosphère constantes d'une certaine composition gazeuse. Conçu pour la culture de micro-organismes exigeant sur la composition gazeuse de l'atmosphère.

4. Réfrigérateurs.Ils sont utilisés dans les laboratoires microbiologiques pour la conservation des cultures de microorganismes, des milieux de culture, du sang, des vaccins, des sérums et autres préparations biologiquement actives à une température d'environ 4 ° C. Pour le stockage des médicaments à des températures inférieures à 0 ° C, des réfrigérateurs à basse température sont utilisés, dans lesquels la température est maintenue à -20 ° C ou -75 "C.

5. Centrifugeuses.Ils sont utilisés pour la sédimentation de microorganismes, érythrocytes et autres cellules, pour la séparation de liquides hétérogènes (émulsions, suspensions). Dans les laboratoires, des centrifugeuses avec différents modes de fonctionnement sont utilisées.

6. Armoire de séchage et de stérilisation(Four Pasteur). Conçu pour la stérilisation à l'air sec de la verrerie de laboratoire et d'autres matériaux résistants à la chaleur.

7. Stérilisateur à vapeur (autoclave).Conçu pour la stérilisation à la vapeur surchauffée (sous pression). Des autoclaves de différents modèles (verticaux, horizontaux, stationnaires, portables) sont utilisés dans les laboratoires microbiologiques.

LES LABORATOIRES BACTÉRIOLOGIQUES, VIRUSOLOGIQUES, MYCOLOGIQUES, IMMUNOLOGIQUES ET LEUR ÉQUIPEMENT. DISPOSITIF DE MICROSCOPES MODERNES. MÉTHODES DE MICROSCOPIE. MÉTHODES D'ÉTUDE DE LA MORPHOLOGIE DES MICRO-ORGANISMES

Programme

1. Règles de travail et d'organisation des laboratoires microbiologiques (bactériologiques, virologiques, mycologiques).

2. Appareils et équipements de base du laboratoire microbiologique.

3. Microscopes et techniques microscopiques. Règles de travail avec un microscope à immersion (objectifs).

Manifestation

1. Conception et application des principaux instruments et équipements utilisés dans les laboratoires microbiologiques: thermostat, centrifugeuses, autoclave, armoire de séchage, instruments et ustensiles.

2. L'appareil d'un microscope biologique. Diverses méthodes de microscopie: champ noir, contraste de phase, luminescent, électronique.

3. Préparations de microbes (levures et bactéries) avec diverses méthodes de microscopie.

Affectation aux étudiants

1. Préparations microscopiques et croisées de champignons du genre levures Candidose en utilisant divers types de microscopie.

Instructions méthodiques

Règles de travail dans les laboratoires microbiologiques.

Le travail dans le laboratoire microbiologique d'une institution médicale est effectué avec des agents pathogènes de maladies infectieuses - des micro-organismes pathogènes.

Par conséquent, afin de se protéger contre les infections, le personnel doit suivre strictement les règlements internes:

1. Tous les employés doivent porter des blouses médicales, des chapeaux et des chaussures interchangeables. Il est strictement interdit d'entrer dans le laboratoire sans peignoir. Dans les cas nécessaires, les travailleurs mettent un masque de gaze sur leur visage. Le travail avec des microbes particulièrement dangereux est réglementé par une instruction spéciale et est effectué dans des laboratoires contrôlés.

2. Il est interdit de fumer et de manger dans le laboratoire.

3. Le lieu de travail doit être maintenu en bon état. Les effets personnels des employés doivent être conservés dans une zone désignée.

4. En cas de contact accidentel avec le matériel infecté sur la table, le sol et d'autres surfaces, cet endroit doit être soigneusement traité avec une solution désinfectante.

5. Le stockage, l'observation des cultures de microbes et leur destruction doivent être effectués conformément à des instructions spéciales. Les cultures de microbes pathogènes sont enregistrées dans un journal spécial.

6. À la fin des travaux, les mains doivent être soigneusement lavées et, si nécessaire, traitées avec une solution désinfectante.

Microscopes et techniques de microscopie

Figure: 1.1. Microscopes.

a - vue générale du microscope "Biolam"; b - microscope MBR-1: 1 - base de microscope; 2 - table des matières; 3 - vis pour déplacer la scène d'objet; 4 - bornes contenant la préparation; 5 - condenseur; 6 - support de condenseur; 7 - vis qui renforce le condenseur dans le manchon; 8 - poignée pour déplacer le condenseur; 9 - poignée du diaphragme à iris du condenseur; 10 - miroir; 11 - support de tube; 12 - poignée de la vis macrométrique; 13 - poignée de la vis micrométrique; 14 - revolver objectif; 15 - lentilles; 16 - tube incliné; 17 - vis de fixation du tu-bus; 18 - oculaire.

Pour les études microbiologiques, plusieurs types de microscopes (biologiques, luminescents, électroniques) et des méthodes microscopiques spéciales (contraste de phase, champ noir) sont utilisés.

Dans la pratique microbiologique, des microscopes de marques nationales sont utilisés: MBR-1, MBI-2, MBI-3, MBI-6, "Bio-lam" R-1, etc. (Fig. 1.1). Ils sont conçus pour étudier la forme, la structure, la taille et d'autres caractéristiques de divers microbes, dont la taille n'est pas inférieure à 0,2-0,3 microns.

Microscopie par immersion

Il est utilisé pour augmenter la résolution de la méthode microscopie optique ... La résolution d'un système de microscopie optique est déterminée par la longueur d'onde de la lumière visible et l'ouverture numérique du système. L'ouverture numérique indique l'angle du cône maximum de lumière entrant dans l'objectif et dépend des propriétés optiques (puissance de réfraction) du milieu entre l'objet et l'objectif. L'immersion de la lentille dans un milieu (huile minérale, eau) à indice de réfraction élevé, proche de celui du verre, empêche la diffusion de la lumière de l'objet.

Figure: 1.2. Le trajet des rayons dans le système d'immersion, n est l'indice de réfraction.

Figure: 1.3. Le trajet des rayons dans les condenseurs de champ noir, un - condensateur paraboloïde; b - condenseur cardioïde; 1 - lentille; 2 - huile d'immersion; 3 - préparation; 4 - surface du miroir; 5 - diaphragme.

Ainsi, une augmentation de l'ouverture numérique et, par conséquent, de la résolution est obtenue. Pour la microscopie à immersion, des objectifs à immersion spéciaux sont utilisés, équipés d'un repère (MI - immersion dans l'huile, VI - immersion dans l'eau). La résolution limite du microscope à immersion ne dépasse pas 0,2 micron. Le trajet des rayons dans le système d'immersion est illustré à la Fig. 1.2.

Le grossissement total d'un microscope est déterminé par le produit du grossissement de l'objectif par le grossissement de l'oculaire. Par exemple, le grossissement d'un microscope avec un objectif à immersion 90 et 10 oculaires est: 90 x 10 \u003d 900.

Microscopie en lumière transmise (microscopie en fond clair)utilisé pour étudier les objets colorés dans des préparations fixes.

Microscopie à fond noir.Il est utilisé pour l'étude intravitale des microbes dans les préparations natives non colorées. La microscopie en champ noir est basée sur le phénomène de diffraction de la lumière sous illumination latérale de particules en suspension dans un liquide ( effet Tyndall). L'effet est obtenu à l'aide d'un condenseur paraboloïde ou cardioïde, qui remplace le condenseur conventionnel dans un microscope biologique (Figure 1.3). Avec cette méthode d'éclairage, seuls les rayons réfléchis par la surface de l'objet pénètrent dans l'objectif. En conséquence, des particules brillantes sont vues sur un fond sombre (champ de vision éteint). La préparation dans ce cas a la forme illustrée à la Fig. 1.4, b (dans l'insert).

Microscopie à contraste de phase.Conçu pour l'étude des médicaments indigènes. Le dispositif de contraste de phase permet de voir des objets transparents au microscope. La lumière traverse différentes structures biologiques à des vitesses différentes, ce qui dépend de la densité optique de l'objet. Le résultat est un changement de phase de l'onde lumineuse qui n'est pas perçue par l'œil. Le dispositif de phase, qui comprend un condensateur spécial et une lentille, convertit les changements de phase d'une onde lumineuse en changements visibles d'amplitude. De cette manière, la différence de densité optique des objets est améliorée. Ils acquièrent un contraste élevé, qui peut être positif ou négatif. Un contraste de phase positif est appelé une image sombre d'un objet dans un champ de vision clair, négatif - une image claire d'un objet sur un fond sombre (voir Fig. 1.4; sur l'encart).

Pour la microscopie à contraste de phase, un microscope conventionnel et un dispositif de contraste de phase supplémentaire KF-1 ou KF-4 (Fig. 1.5), ainsi que des illuminateurs spéciaux, sont utilisés.

Microscopie à luminescence (ou fluorescence).Basé sur le phénomène de photoluminescence.

Luminescence- la luminescence de substances sous l'influence d'un rayonnement extérieur: lumière, ultraviolets, ionisants, etc. Photoluminescence - luminescence d'un objet sous l'influence de la lumière. Si vous illuminez un objet luminescent avec une lumière bleue, il émet des rayons de rouge, orange, jaune ou vert. Le résultat est une image couleur de l'objet.

Figure: 1.5. Dispositif de contraste de phase, a - objectifs de phase; b - microscope auxiliaire; c - condensateur de phase.

La longueur d'onde de la lumière émise (couleur de luminescence) dépend de la structure physico-chimique de la substance luminescente.

Primaireluminescence d'objets biologiques (posséder,ou bioluminescence) est observée sans coloration préalable due à la présence de ses propres substances luminescentes, secondaire (survolant) -se produit à la suite de préparations de coloration avec des colorants luminescents spéciaux - fluorochromes(acridine orange, auromin, corifosfine, etc.). La microscopie à luminescence présente un certain nombre d'avantages par rapport aux méthodes conventionnelles: la capacité d'examiner les microbes vivants et de les détecter dans le matériau d'essai à de faibles concentrations en raison du degré élevé de contraste.

Dans la pratique de laboratoire, la microscopie à fluorescence est largement utilisée pour identifier et étudier de nombreux microbes.

Microscopie électronique.Vous permet d'observer des objets qui sont en dehors de la résolution du microscope optique (0,2 microns). Le microscope électronique est utilisé pour étudier les virus, la structure fine de divers micro-organismes, les structures macromoléculaires et d'autres objets sous-microscopiques. Les rayons lumineux dans de tels microscopes sont remplacés par un flux d'électrons, qui à certaines accélérations a une longueur d'onde d'environ 0,005 nm, c'est-à-dire près de 100 000 fois plus courte que la longueur d'onde de la lumière visible. La haute résolution du microscope électronique, atteignant 0,1-0,2 nm, permet d'obtenir un grossissement utile total allant jusqu'à 1 000 000.

Avec les appareils de type "translucide", utilisez microscopes électroniques à balayage,fournir une image en relief de la surface de l'objet. Le pouvoir de résolution de ces dispositifs est bien inférieur à celui des microscopes électroniques de type «transmission».

Règles pour travailler avec un microscope

Travailler avec n'importe quel microscope optique comprend l'installation de l'éclairage correct du champ de vision et de l'échantillon et sa microscopie avec divers objectifs. L'éclairage peut être naturel (lumière du jour) ou artificiel, pour lequel des sources de lumière spéciales sont utilisées - des illuminateurs de différentes marques.

Lors de la microscopie de préparations avec une lentille à immersion, un certain ordre doit être strictement respecté:

1) appliquez une goutte d'huile d'immersion sur un frottis coloré préparé sur une lame et placez-la sur la lame en la fixant avec des pinces;

2) tournez le revolver jusqu'à la marque 90x ou 10Ox de l'objectif d'immersion;

3) abaissez soigneusement le tube du microscope jusqu'à ce que l'objectif soit immergé dans une goutte d'huile;

4) régler la mise au point approximative à l'aide de la vis macrométrique;

5) effectuer la mise au point finale de la préparation avec une vis micrométrique, en la faisant tourner à l'intérieur juste un tour.Ne laissez pas l'objectif entrer en contact avec
paratome, car cela peut entraîner la rupture du verre de protection ou de la lentille frontale de l'objectif (la distance libre de l'objectif à immersion est de 0,1 à 1 mm).

À la fin de l'opération du microscope, enlever l'huile de la lentille d'immersionet transférez le revolver sur un petit objectif 8x.

Pour la microscopie à fond noir et à contraste de phase, des préparations natives sont utilisées (goutte "écrasée", etc., voir le sujet 2.1); microscopie avec un objectif 40x ou un objectif à immersion spécial avec un diaphragme à iris qui vous permet d'ajuster l'ouverture numérique de 1,25 à 0,85. L'épaisseur des diapositives ne doit pas dépasser 1 - 1,5 mm, les lamelles de couverture - 0,15-0,2 mm.

Presque tous les établissements de santé disposent de laboratoires spéciaux où vous pouvez passer des tests. Cela aide à mener des recherches médicales, ce qui est important pour identifier la maladie et établir un diagnostic précis chez un patient de cette institution. Le laboratoire médical est conçu pour mettre en œuvre diverses méthodes de recherche. Examinons de plus près quels types de tests peuvent aider à déterminer la maladie.

Où peut être situé un laboratoire médical?

Dans les cliniques et les hôpitaux, il existe forcément de tels laboratoires, c'est en eux que sont menées les études suivantes:

Les laboratoires des consultations pour femmes, des dispensaires spéciaux et même des sanatoriums doivent être mis en évidence séparément. Ces laboratoires sont appelés laboratoires de profil, car ils travaillent exclusivement dans leur spécialisation. Dans les grandes institutions médicales, il existe des laboratoires centralisés. Dans de tels endroits, des équipements complexes sont installés, de sorte que tous les diagnostics sont effectués à l'aide de systèmes qui fonctionnent automatiquement.

Quels types de laboratoires médicaux existe-t-il?

Il existe différents types de tests de laboratoire, et les types de laboratoires eux-mêmes en dépendront:

Des tests de laboratoire, dont les objectifs sont liés au fait qu'il est possible de délivrer un diagnostic clair au patient dans des conditions modernes, sont nécessaires. Les institutions modernes peuvent effectuer une vaste gamme d'analyses différentes, ce qui a un effet bénéfique sur le niveau de soins médicaux et de traitement des patients atteints de diverses maladies. Pour la préparation de telles analyses, tout matériel biologique dont dispose une personne peut être utile, par exemple, le plus souvent, l'urine et le sang sont examinés, dans certains cas, des expectorations, un frottis et un grattage sont prélevés.

A quoi servent les résultats des tests de laboratoire et quel est leur rôle en médecine?

Les tests de laboratoire jouent un rôle important en médecine. Tout d'abord, l'obtention des résultats des tests est nécessaire pour clarifier le diagnostic et commencer immédiatement un traitement correct. La recherche aide également à déterminer quelle option de traitement sera optimale pour chaque patient individuellement. Dans de nombreux cas, des pathologies graves peuvent être reconnues à un stade précoce grâce à de telles mesures. Si le diagnostic a été effectué correctement, le médecin peut évaluer l'état de son patient à près de 80%. Le sang est l'un des matériaux les plus importants qui peuvent en dire long sur l'état d'une personne. Presque toutes les maladies peuvent être détectées grâce à cette analyse clinique. Ce sont les écarts avec les normes qui aident à connaître l'état de santé.Par conséquent, dans certains cas, des analyses de laboratoire peuvent être effectuées plusieurs fois.

Quels types de tests de laboratoire existe-t-il?

Un laboratoire clinique peut effectuer les tests suivants:

Le tout premier test de laboratoire attribué à un patient dans la clinique est un test sanguin. Le fait est que même le moindre changement dans le corps humain affectera nécessairement sa composition sanguine. Le liquide que nous appelons le sang traverse tout le corps et contient de nombreuses informations sur son état. C'est grâce à sa connexion avec tous les organes humains que le sang aide le médecin à se forger une opinion objective sur l'état de santé.

Types de tests sanguins et objectif de leur conduite

Un laboratoire médical peut effectuer plusieurs types de tests sanguins, essentiellement la méthode de leur conduite et le type dépendra de l'objectif pour lequel ces études sont effectuées, par conséquent, tous les types de tests sanguins doivent être considérés plus en détail:

Pourquoi des analyses d'urine en laboratoire sont-elles effectuées?

L'analyse en laboratoire de l'urine est basée sur l'étude des caractéristiques physiques telles que la quantité, la couleur, la densité et la réponse. À l'aide d'une analyse chimique, les protéines, la présence de glucose, les corps cétoniques, la bilirubine, les urobilinoïdes sont déterminés. Une attention particulière est portée à l'étude des sédiments, car c'est là que l'on peut trouver des particules épithéliales et des impuretés sanguines.

Les principaux types d'analyses d'urine

Le diagnostic principal est une analyse urinaire générale, ce sont ces études qui permettent d'étudier les propriétés physiques et chimiques d'une substance et d'en tirer certaines conclusions, mais en plus de ce diagnostic, il existe de nombreuses autres analyses:

Comment une analyse de laboratoire pour la cytologie est-elle effectuée?

Pour déterminer si les femmes ont des cellules cancéreuses dans leur corps, le laboratoire effectue des tests cytologiques. Dans ce cas, le gynécologue peut prendre un grattage du col de l'utérus du patient. Pour effectuer une telle analyse, vous devez vous y préparer; pour cela, le gynécologue vous indiquera ce qui doit être fait pour que l'analyse ne donne pas de résultats erronés. Cet essai clinique est souvent recommandé pour toutes les femmes de plus de 18 ans deux fois par an pour éviter la formation de tumeurs.

Comment les prélèvements de gorge sont-ils testés?

Si une personne souffre souvent de maladies des voies respiratoires supérieures, le médecin peut lui prescrire un test clinique, appelé frottis du pharynx, afin que la flore pathologique puisse être reconnue à temps. Avec l'aide d'une telle étude, vous pouvez connaître le nombre exact de microbes pathogènes et commencer un traitement rapide avec un médicament antibactérien.

Comment s'effectue le contrôle qualité des analyses analysées?

Les tests sanguins et urinaires de laboratoire doivent être précis, car, sur cette base, le médecin pourra prescrire des diagnostics ou des traitements supplémentaires. Il n'est possible de dire sur les résultats des analyses qu'après la comparaison des échantillons de contrôle en fonction des résultats des mesures effectuées. Lors de la conduite d'une étude clinique, les substances suivantes sont utilisées: sérum sanguin, solutions aqueuses standard, divers matériaux biologiques. De plus, des matériaux d'origine artificielle peuvent être utilisés, par exemple des champignons pathogènes et des cultures microbiologiques spécialement cultivées.

Comment les résultats des tests sont-ils évalués?

Pour donner une évaluation complète et précise des résultats des analyses cliniques, une telle méthode est souvent utilisée lorsque le laboratoire enregistre les analyses sur une carte spéciale et y met des notes quotidiennes. Une carte est construite pendant un certain temps, par exemple, le matériel de contrôle est étudié pendant deux semaines, pour que tous les changements observés soient enregistrés sur la carte. Dans les cas difficiles, le médecin doit constamment garder le contrôle du laboratoire sur l'état de son patient, par exemple, cela est nécessaire si le patient se prépare à une opération majeure. Pour que le médecin ne se trompe pas dans les résultats, il doit nécessairement connaître les lignes entre norme et pathologie dans les analyses de son service. Les indicateurs biologiques peuvent varier légèrement, mais certains ne devraient pas être fortement soulignés. Dans d'autres cas, si les indicateurs changent de seulement 05 unités, cela suffit amplement pour des changements irréversibles graves dans le corps humain. Comme vous pouvez le constater, les diagnostics de laboratoire, les analyses jouent un rôle important dans la vie de chaque personne, ainsi que dans le développement de la médecine, car avec l'aide des résultats cliniques obtenus, de nombreux patients parviennent à sauver des vies.

Méthodes de recherche en laboratoire - recherche de matériel biologique ( biosubstrats). Biomatériaux - sang, ses composants (plasma, érythrocytes), urine, matières fécales, suc gastrique, bile, expectorations, fluides exsudatifs, tissus des organes parenchymateux obtenus au cours biopsies.

Le but de la recherche en laboratoire:

• établir l'étiologie de la maladie (sa cause); c'est parfois le seul critère pour évaluer la situation clinique - par exemple, les maladies infectieuses;
• le rendez-vous du traitement;
• suivi de l'efficacité du traitement en dynamique.

Les tests de laboratoire sont prescrits et évalués par un médecin. Dans la phase de laboratoire, le personnel du laboratoire est responsable. Dans la phase de pré-analyse, l'infirmière joue un rôle important:

• prépare le patient à la recherche, lui fournit la verrerie de laboratoire, établit une référence pour la recherche;
• effectue un échantillonnage du biomatériau, assure un stockage adéquat;
• transporte le matériel au laboratoire.

La fiabilité de la recherche dépend de la manière dont cette étape passera correctement.

Types de laboratoires, leur objectif

Clinique et diagnostique

Détermination des propriétés physiques et chimiques des substrats biologiques et microscopie. Par exemple, analyse générale (sang, urine, expectorations, fèces), analyses d'urine selon Zimnitsky et Nechiporenko, matières fécales pour sang occulte, matières fécales pour œufs d'helminthes, analyse générale du suc gastrique et de la bile, exsudats et transsudats, liquide céphalo-rachidien, etc. Pour transporter les biomatériaux au laboratoire, utilisez de la verrerie propre et sèche ou des récipients jetables spéciaux.

Biochimique

Détermination des propriétés chimiques des substrats biologiques. Par exemple, des tests sanguins hépatiques (protéines totales, bilirubine, thymol et tests sublimés), sang pour tests rhumatismaux (protéine C-réactive, test formol), une étude du métabolisme lipidique (bêta-lipoprotéines, cholestérol total), enzymes (ALAT, ASAT, LDH et etc.), étude du métabolisme des glucides (glycémie), test sanguin pour le fer, pour la teneur en électrolytes, étude biochimique de la bile et de l'urine, etc.

Bactériologique (laboratoire de microbiologie clinique)

Révélation de la composition microbienne et identification de la microflore (sang pour stérilité, urine pour biopsie, fèces pour le groupe intestinal et dysbactériose, prélèvements de la gorge et du nez avec suspicion de diphtérie et d'infection à méningocoque, tests sanguins sérologiques, etc.). Pour la collecte de matériel, il est nécessaire d'obtenir de la verrerie de laboratoire stérile. Le matériel doit être collecté avant de commencer une antibiothérapie.

Le processus infirmier implique une évaluation complète de l'état de santé du patient. La première étape comprend un examen subjectif et objectif.

Un examen objectif détermine, en plus d'un examen physique, des méthodes supplémentaires:

• Laboratoire;

• Instrumentale (fluoroscopie, endoscopie, échographie, radio-isotope).

La branche laboratoire de la médecine pratique est le principal, parfois le seul critère de diagnostic pour évaluer la situation clinique de nombreuses maladies infectieuses et non infectieuses.

L'exactitude de tous les aspects du diagnostic est déterminée par la qualité de toutes les étapes de l'étude: préanalytique, analytique, postanalytique.

Préanalytiqueétape - l'infirmière prépare le patient à l'étude, prend le biomatériau, veille à son bon stockage, transporte, enregistre et documente. L'infirmière est responsable de l'exactitude des études pré-laboratoire.

Analytique (laboratoire)stade - un diagnosticien effectue directement un test de laboratoire. À ce stade, le personnel du laboratoire est responsable.

Post-analytique (post-laboratoire) stade - interaction entre le personnel du laboratoire et les cliniciens hospitaliers pour évaluer les résultats de l'étude.

Le matériel de recherche en laboratoire est constitué de divers fluides biologiques (substrats): sang, ses composants (plasma, érythrocytes), urine, fèces, suc gastrique, bile, crachat, exsudat (exsudat, transsudat), tissus d'organes parenchymateux obtenus par biopsie.

RAPPELLES TOI!

• Avant de prendre un substrat biologique, il est nécessaire d'obtenir le consentement éclairé du patient pour effectuer la procédure.
• La confidentialité des résultats de l'enquête doit être respectée.

SAVOIR!

• L'urgence de l'examen du matériel biologique est indiquée par le symbole "CITO"

Règles pour la collecte, le stockage et le transport des biomatériaux.

Suivre:

• préparation du patient avant de prendre du matériel pour la recherche (prélèvement de sang à jeun, prise en compte des dispenses physiologiques, pathologie concomitante, prise de médicaments);
• identité des conditions de collecte (exigences relatives à la verrerie de laboratoire, volume et état du matériel);
• règles d'application d'un garrot veineux (un clampage prolongé aide à augmenter la concentration d'hémoglobine, de protéines, de minéraux en raison de la libération de liquide dans les tissus);
• l'utilisation d'inhibiteurs et de conservateurs, si nécessaire (certains tests d'urine, fèces pour la microflore);
• règles de stockage (régime de température, conditions, verrerie de laboratoire, conteneurs, véhicules).

Facteurs de risque pour les résultats de laboratoire:

• Exogène - pharmacothérapie, technique d'échantillonnage, propreté / stérilité de la verrerie de laboratoire.
• Endogène - hémolyse due à une exposition mécanique et au froid, violation du régime alimentaire.

La fiabilité des résultats des méthodes de recherche en laboratoire détermine l'exclusion des facteurs exogènes et endogènes.

Types de laboratoires, leur objectif.

Diagnostic clinique

Détermination des propriétés physico-chimiques des substrats biologiques (par exemple, analyse générale du sang, de l'urine, des expectorations; test sanguin biochimique: cholestérol, protéines totales, bilirubine; matières fécales pour sang occulte, œufs d'helminthes, protozoaires).

Pour transporter les biomatériaux au laboratoire, utilisez des contenants spéciaux (jetables) ou de la verrerie propre et sèche.

Bactériologique.

Identification de la composition microbienne, identification de la microflore (par exemple, urine pour stérilité, matières fécales pour le groupe intestinal, frottis du pharynx en cas de suspicion de diphtérie).

L'infirmière reçoit des plats stériles préparés dans le laboratoire bactériologique pour prélèvement.

Immunologique / virologique

Mener des recherches sur les marqueurs de certains agents infectieux, ainsi que sur les anticorps naturels (normaux) contre les bactéries et virus répandus (sang pour VIH, hépatites B et C, infection RW).

Recherche et collecte de sang pour diverses méthodes.

Les tests sanguins morphologiques et biochimiques les plus courants. Pour tous les patients de tout service médical et selon les indications pour les patients ambulatoires, le médecin prescrit une prise de sang générale.

Le test sanguin clinique général (CBC) comprend la détermination de: la concentration d'hémoglobine, le nombre d'érythrocytes, l'indice de couleur, la vitesse de sédimentation des érythrocytes (ESR), le nombre de leucocytes avec comptage différencié de certains types de cellules (formule leucocytaire).

Dans les situations d'urgence, l'un des indicateurs les plus informatifs, par exemple dans l'appendicite aiguë, est le nombre de leucocytes.

Le prélèvement de sang pour une analyse générale est effectué par un assistant-spécialiste de laboratoire d'un laboratoire clinique, pour le diagnostic biochimique du sang, l'infirmière de la salle de traitement le prend. La veille, l'infirmière informe le patient de l'étude à venir. Le prélèvement sanguin est effectué le matin à jeun.

Lors du prélèvement de sang dans une veine, le temps d'application du garrot doit être minimal, tandis que le «travail du poing» est exclu. Sinon, une stase locale, une hypoxie, un déplacement de la distribution de certaines substances (potassium, sodium, cholestérol) entre les éléments formés du sang et sa partie liquide sont possibles.

Pour un coagulogramme, les premiers 0,5 à 1,0 ml de sang ne sont pas prélevés, mais cette portion de sang peut être utilisée pour tous les autres tests biochimiques.

Dans les conditions modernes, des dispositifs spéciaux tels que les "vacutainers" permettent d'exclure la contamination des biomatériaux. Cela contribue au respect des conditions aseptiques et accélère la procédure de prélèvement sanguin.

1. Informez le patient de l'étude à venir la veille.
2. Faites une référence au laboratoire.
3. Expliquez la procédure pour la procédure: le matin, à jeun, avant les procédures médicales et diagnostiques.
4. Transporter le biosubstrat au laboratoire approprié du service médical dans un conteneur spécial.