Un test sanguin correctement effectué aide à détecter les agents responsables de diverses maladies complexes dans le corps aux premiers stades de leur développement, et parfois même avant leur manifestation symptômes cliniques maladie. Très souvent, les médecins prescrivent aux patients une analyse de la réaction d'agglutination. Ensuite, nous déterminerons de quoi il s'agit - un test sanguin RPHA, quand est-il utilisé et que peut-il dire?

Principe de fonctionnement

Réaction d'hémagglutination indirecte (également appelée réaction hémagglutination passive aka RPHA, RNGA) se produit lorsque les érythrocytes qui ont adsorbé un antigène sont exposés à un sérum immun qui correspond à un antigène donné.

Des études ont prouvé qu'en termes de spécificité et de sensibilité, cette méthode est nettement supérieure aux autres tests sérologiques. Par conséquent, il est souvent utilisé pour détecter les maladies causées par des bactéries ou des rickettsies. Des extraits bactériens, des antigènes purifiés de divers microbes, des composants de vaccins bactériens peuvent agir comme antigènes pour une telle analyse.

Après qu'une bactérie pathogène pénètre dans le corps humain, des anticorps spécifiques et non spécifiques commencent à y être produits, formant une réponse immunitaire spécifique. Dans le cas de la syphilis, dont l'agent causal est considéré comme un tréponème pâle, appartenant à des spirochètes à Gram négatif, des anticorps non tréponémiques ou tréponémiques sont produits dans le sang humain. Les tests de diagnostic de laboratoire sont basés sur leur identification, qui devrait confirmer ou infirmer la présence de l'agent causal du virus dans le corps.

Avec RPHA, les érythrocytes, dont la surface a adsorbé les antigènes du tréponème pâle, lorsque du sérum contenant des anticorps contre le tréponème d'une personne infectée par la syphilis est ajouté, collent les uns aux autres, c'est-à-dire qu'ils s'agglutinent.

Fiabilité de l'étude

Il est important de se rappeler que les anticorps dirigés contre le spirochète pallidum commencent à apparaître dans le corps des personnes infectées 2 à 4 semaines après l'infection, et dans certains cas, cette période peut s'étendre jusqu'à 6 semaines.

Pour cette raison, la sensibilité de l'analyse de la RPHA au stade primaire du développement de la maladie est d'environ 86%, ce qui est significativement inférieur à la précision du diagnostic des patients aux deux étapes suivantes. La sensibilité de l'analyse pour ces patients, ainsi que pour les porteurs de syphilis latente, atteint 99-100%.

Cependant, la réaction d'hémagglutination passive a une spécificité très élevée, qui atteint le niveau de 96-100%.

Cela permet d'utiliser cet examen pour confirmer le diagnostic en cas de réaction positive d'une étude préliminaire non tréponémique, par exemple une réaction de microprécipitation du cancer de la vessie.

Étant donné que la sensibilité des tests tréponémiques, y compris la RPHA, dépasse largement la sensibilité des méthodes non tréponémiques, ces tests sont de plus en plus prescrits lors des tests de dépistage de la syphilis. Cependant, lorsqu'un test de dépistage positif est obtenu, une analyse plus spécifique (tréponémique) est nécessaire pour clarifier le diagnostic, mais pas la RPHA.

Analyse de décodage

Lorsque du sérum contenant des anticorps contre le tréponème provenant du matériel d'une personne infectée par la syphilis est ajouté au réactif avec lequel l'étude est réalisée, une agglutination des érythrocytes se produit, à la suite de laquelle ils précipitent.

Le nombre de globules rouges collés est influencé par le taux d'anticorps dans le sérum. Par conséquent, l'hémagglutination passive montre non seulement la présence d'anticorps, mais vous permet également d'établir leur nombre. Le résultat du test est présenté par le niveau de titre d'anticorps.

Une réaction positive indique la présence d'un agent causal dans le corps du patient. Cependant, au cours du diagnostic, des réactions faussement positives peuvent apparaître, dont le nombre ne dépasse pas statistiquement le niveau de 0,05 à 2,5% du nombre total d'études.

Une réaction RPHA positive chez les personnes non infectées par la syphilis peut se manifester en présence de:

• maladies systémiques du tissu conjonctif,
• dans le sang du patient, des anticorps dirigés contre des agents pathogènes similaires au tréponème sont pâles,
• pathologies physiologiques, telles que l'infarctus du myocarde,
• hépatite B ou C,
• maladies oncologiques,
• typhoïde, leptospirose, tuberculose,
• Infection par le VIH,
• borréliose d'étiologie transmise par les tiques,
• blessures ou fractures étendues,
• grossesse,
• dans le cas de l'injection de drogue.

Dans la plupart des cas, les réactions faussement positives sont accompagnées d'un titre bas. Des taux de titre élevés sont typiques du stade secondaire de la maladie et de la syphilis précédemment latente. Cependant, ils peuvent également apparaître avec une réaction faussement positive chez les patients atteints de néoplasmes malins.

Chez les personnes qui ont eu la syphilis au moins une fois, la réaction RPHA reste positive pour le reste de leur vie.

De rares exceptions peuvent être les situations où la maladie a été détectée le stade précoce développement, après quoi une thérapie intensive et efficace a été réalisée. Par conséquent, l'analyse de la RPHA ne peut pas être utilisée pour évaluer la dynamique de récupération ou le diagnostic comparatif des stades précoces ou tardifs de la maladie.

Lors de la réception d'une réaction positive, il est nécessaire d'examiner les membres de la famille de la personne malade et les personnes qui ont eu des contacts sexuels avec lui.

Une réaction négative peut être obtenue dans les cas suivants:

• la personne n'est pas atteinte de syphilis,
• le sang n'a pas été prélevé correctement pour la recherche,
• 2 à 4 semaines se sont écoulées depuis l'infection et la production d'anticorps n'a pas encore commencé.

Dans tous les cas, le résultat de l'étude doit être évalué en combinaison avec des indicateurs de laboratoire et anamnestiques supplémentaires.

À qui l'analyse est-elle présentée?

Le médecin peut demander aux patients de faire un don de sang pour RPHA dans les cas suivants:

• en présence de manifestations cliniques syphilis: éruptions cutanées ulcéreuses, ganglions lymphatiques hypertrophiés, alopécie diffuse et autres,
• si vous suspectez une éventuelle infection en cas de contact avec des personnes déjà malades,
• les donneurs souhaitant faire un don de sang,
• les personnes qui subissent des examens préventifs annuels ou rédigent des carnets de santé,
• les patients avec un test de dépistage positif,
• avant l'admission dans un établissement médical hospitalier,
• lors de l'examen préopératoire,
• identifier les agents responsables de la salmonellose, de la diphtérie, de la dysenterie par la méthode de RPHA avec le diagnosticum approprié.

Procédure de recherche

Un échantillon de sang veineux donné par le patient est envoyé pour examen. Afin de ne pas tirer une conclusion erronée, le patient doit adopter une attitude responsable lors de la préparation de l'analyse. Pour que les résultats des tests soient fiables, vous devez respecter les recommandations suivantes:

• L'analyse doit être effectuée uniquement à jeun.
• Le jour de l'analyse, vous pouvez boire eau minérale sans gaz en quantités minimales.
• Ne fumez pas pendant au moins 30 minutes avant l'analyse, mais il vaut mieux augmenter ce temps à plusieurs heures.
• Une interdiction directe est imposée à la consommation de boissons alcoolisées.
• Les patients qui ont besoin d'utiliser régulièrement médicaments, assurez-vous d'informer le médecin qui envoie l'examen à ce sujet.
• Si vous ne vous sentez pas bien ou si vous vous sentez mal, informez-en l'infirmière qui prélève le sang ou le médecin de la clinique externe où vous devez passer le test.

Adoptez une attitude responsable non seulement sur la question de savoir où réussir l'analyse, mais également sur la préparation de l'examen.

Diagnostic d'autres maladies infectieuses

Il ne faut pas penser qu'une étude telle que la RPHA ne peut être menée que pour identifier l'agent causal de la syphilis dans le corps.

L'analyse avec la salmonelle diagnostique vous permet de détecter la présence d'une infection dans le système digestif - la salmonelle. À partir du quatrième jour après l'infection, le corps produit des anticorps contre les antigènes de Salmonella, que la méthode RPHA aide à identifier. Un résultat négatif indique l'absence d'infection, et sa présence sera indiquée par un titre positif, passant de 1: 200 à 1: 800 en phase aiguë.

La méthode de RPHA avec un marqueur diphtérique permet de diagnostiquer la diphtérie et d'évaluer l'immunité après vaccination. Les anticorps commencent à être produits par le système immunitaire dès le lendemain de l'infection et restent dans le corps pendant plusieurs semaines. La sensibilité de cette analyse est supérieure à la méthode de recherche bactériologique. Un titre de 1:80 confirme la présence de diphtérie dans le corps.

Le marqueur de dysenterie dans RPHA détecte le plus précisément la shigellose (dysenterie bactérienne), même en comparaison avec les diagnostics de laboratoire utilisant la culture bactérienne. Si le patient ne reçoit pas de traitement de qualité, la maladie évolue dans un processus chronique, dans lequel des rechutes se produisent souvent. L'analyse permet de diagnostiquer la phase aiguë et chronique de la diarrhée, d'identifier l'agent causal de la dysenterie, de distinguer la shigellose bactérienne du cancer colorectal, troubles endocriniens ou une inflammation du côlon. Une réaction négative indique l'absence du bacille, et confirme sa présence par un titre de 1:80 pour les bébés ou de 1: 320 pour les adultes.

Des tests avec un marqueur de la rougeole peuvent être utilisés pour identifier la maladie de la rougeole. Cet examen peut être une alternative au test RTGA qui est souvent utilisé pour diagnostiquer la rougeole.

Alors, test sanguin RPGA - qu'est-ce que c'est? En résumé, nous pouvons affirmer avec certitude qu'il s'agit d'une méthode moderne, hautement sensible et fiable pour diagnostiquer diverses maladies d'étiologie bactériologique.

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Test TPHA (test d'hémagglution de Treponema pallidum) Le test TPHA est un test tréponémique de diagnostic spécifique qui détecte les anticorps dirigés contre l'antigène Treponema pallidum. Conformément à l'ordre du ministère russe de la Santé, un test sanguin dans le test TPHA en combinaison avec le test RPR remplace le réglage du CSR (complexe de réactions sérologiques pour la syphilis). N ° TPHA - réaction d'hémagglutination passive avec les antigènes du tréponème pallidum
TPHA est un test pour la présence d'anticorps spécifiques contre le treponema pallidum (le micro-organisme responsable de la syphilis).
Les fonctions
Caractéristiques de l'infection
Indications aux fins de l'analyse
Préparation à la recherche
Unités de mesure et valeurs de référence
Résultat positif
Résultat négatif

Les fonctions.
Test TPHA (test d'hémagglution de Treponema pallidum) Le test TPHA est un test tréponémique de diagnostic spécifique qui détecte les anticorps dirigés contre l'antigène Treponema pallidum. Conformément à l'ordre du ministère russe de la Santé, un test sanguin dans le test TPHA en combinaison avec le test RPR remplace le réglage du CSR (complexe de réactions sérologiques pour la syphilis). Le test TPHA peut être utilisé comme test de confirmation diagnostique de la syphilis et comme test de dépistage très efficace.
La réponse TPHA devient positive en moyenne après 4 semaines d'infection. Les titres de TPHA sont généralement faibles dans la syphilis primaire (1: 80-1: 320), augmentent sensiblement au stade secondaire, atteignant 1: 5120 et plus. Les titres diminuent pendant la phase de latence, mais restent positifs, souvent avec des valeurs faibles (1: 80-1: 1280). Les titres de TPHA peuvent diminuer après le traitement, cependant, les résultats des tests TPHA chez les personnes atteintes de syphilis restent presque toujours positifs. Le TPHA est la méthode la plus sensible et la plus spécifique pour détecter les anticorps dirigés contre Treponema pallidum. Un petit nombre de faux négatifs sont généralement associés à une primo-infection précoce, et c'est la seule raison pour laquelle le TPHA n'est pas utilisé comme test de dépistage unique. Le test anti-cardiolipine RPR (Rapid Plasma Reagin) est un test complémentaire adéquat. Les deux tests sont complémentaires et l'utilisation combinée du RPR et du TPHA représente la meilleure option de dépistage pour détecter ou exclure la syphilis à tous les stades.
Caractéristiques de l'infection.
La syphilis est une maladie infectieuse chronique caractérisée par des dommages multisystémiques au corps. L'agent causal de la syphilis - Treponema pallidum - est instable dans l'environnement, mais est bien conservé dans le matériel biologique humide (sperme, sécrétions vaginales, mucus, pus, etc.). Transmis par voie sexuelle, parentérale, domestique, transplacentaire. Le risque d'infection est augmenté par d'autres infections sexuellement transmissibles: herpès, chlamydia, infection par le papillomavirus humain, etc.), ainsi que par des lésions de la membrane muqueuse lors d'un contact anal. Treponema pallidum a plusieurs antigènes qui provoquent la production d'anticorps. L'un d'eux est similaire à la cardiolipine, ce qui permet d'utiliser cette dernière pour détecter l'immunité au treponema pallidum.
L'infection par une personne malade est possible à n'importe quelle période de syphilis. Les plus infectieuses sont la syphilis primaire et secondaire en présence de manifestations actives sur la peau et les muqueuses. Le tréponème pâle pénètre à travers des microdommages de la peau ou des muqueuses dans les vaisseaux lymphatiques, puis dans les ganglions lymphatiques. De plus, le pathogène se propage à travers les organes et peut être détecté dans tous les milieux biologiques (salive, lait maternel, sperme, etc.).
Dans le cours classique, la période d'incubation dure 3-4 semaines, le séronégatif primaire - 1 mois, puis le séropositif primaire - 1 mois, puis la période secondaire - 2-4 ans, puis la période tertiaire. Dans la période primaire, un chancre dur se produit (un ulcère ou une érosion indolore avec un fond dense au site de pénétration du tréponème pallidus), accompagné d'une lymphangite régionale et d'une lymphadénite. À la fin de la période primaire, le chancre guérit tout seul et la lymphadénite se transforme en polyadénite et dure jusqu'à cinq mois.
La première éruption cutanée généralisée est le signe du début d'une période secondaire. Les syphilides secondaires apparaissent par vagues (pendant 1,5 à 2 mois chaque vague) et disparaissent d'elles-mêmes. Ils peuvent être représentés par des syphilides tachetées, papuleuses, pustuleuses, une alopécie syphilitique (calvitie) et une leucodermie syphilitique ("collier de Vénus"). Dans la seconde moitié de l'année de la syphilis secondaire, la polyadénite disparaît.
L'apparition de syphilides tertiaires (tubercules et gommes) marque le début de la période tertiaire, qui survient chez 40% des patients non traités et mal traités. Les vagues de la période tertiaire sont séparées par des périodes plus longues (parfois à long terme) de l'évolution latente de l'infection. Des changements destructeurs se produisent dans les organes et tissus affectés. Les syphilides tertiaires contiennent extrêmement peu de tréponèmes, elles ne sont donc pratiquement pas contagieuses. La force du système immunitaire diminue (puisque le nombre de tréponèmes pâles diminue), une nouvelle infection devient donc possible (resurinfection).
La transmission de la syphilis à la progéniture est plus probable au cours des trois premières années de la maladie. Il en résulte des fausses couches tardives (12 à 16 semaines), une mortinaissance, une syphilis congénitale précoce et tardive. L'atteinte fœtale est plus probable au 5e mois de grossesse et pendant l'accouchement. Les manifestations de la syphilis congénitale précoce surviennent immédiatement après la naissance et sont similaires à celles de la syphilis secondaire. La syphilis de la syphilis congénitale tardive survient entre 5 et 17 ans et est similaire aux manifestations de la syphilis tertiaire. Les signes incontestés incluent la triade de Hutchinson (dents de Hutchinson, kératite parenchymateuse, surdité labyrinthique).
Le diagnostic de syphilis doit être confirmé par des tests de laboratoire, cependant, dans certains cas, il peut être justifié, malgré les résultats négatifs des tests sérologiques. Sens spécial diagnostic de laboratoire a la syphilis dans les catégories de sujets suivantes:
Catégorie de l'enquête
Les raisons
Femmes se préparant à la grossesse
1. Évolution éventuellement latente ou syphilis décapitée (syphilis sans chancre dur, syphilis transfusionnelle, lorsque le tréponème pénètre directement dans le sang pendant la transfusion sanguine, coupure);
2. La transmission familiale ou parentérale est possible.
Femmes enceintes
Un traitement complexe au cours des 4 premiers mois de la grossesse évite l'infection du fœtus.
Indications aux fins de l'analyse:
1. Confirmation en laboratoire de la syphilis;
2. Préparation à la grossesse;
3. Préparation à la chirurgie;
Préparation à la recherche: non requise.
Matériel de recherche: sérum.
Méthode de détermination: réaction d'hémagglutination indirecte. Le réactif contient des érythrocytes aviaires recouverts de molécules d'antigène Treponema.pallidum. En présence d'anticorps syphilitiques, les érythrocytes sensibilisés s'agglutinent, formant une forme caractéristique dans le mélange réactionnel.
Les résultats du test TPHA en cas de résultat positif sont exprimés semi-quantitativement - en titres (c'est-à-dire que la dilution maximale du sérum à laquelle une réaction positive est détectée est indiquée).
En cas de détection d'anticorps spécifiques à Treponema pallidum dans le test TPHA, le résultat est "positif", le titre est indiqué dans la colonne des commentaires.
Si des anticorps spécifiques contre Treponema pallidum ne sont pas détectés dans le test TPHA, un résultat négatif est renvoyé. Avec des crédits très bas, le commentaire est marqué "douteux, il est recommandé de le répéter dans 10 à 14 jours". Valeurs de référence: négatives.
Positivement:
1. Syphilis à divers stades cliniques, y compris une syphilis correctement traitée.

Négativement:
1. Il n'y a pas de syphilis;
2. Syphilis primaire précoce.
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Bactéries ureaplasma parvum et urealiticum sont conditionnellement pathogènes pour l'homme, mais sous l'influence de certains facteurs négatifs pour la santé du porteur, ils peuvent provoquer diverses maladies du système génito-urinaire.

Et bien qu'aujourd'hui le mot ureaplasmose n'apparaisse pas dans la classification internationale des maladies, il est inutile de nier le rôle négatif de la reproduction incontrôlée et agressive des bactéries des agents responsables de cette maladie.

Le plus souvent, le terme ureaplasmose est utilisé si le patient a processus inflammatoire muqueuse du tractus génito-urinaire, et à part les bactéries, rien n'a été trouvé. Habituellement, l'urétrite peut servir de manifestations de cette bactérie. chez les hommes , salpingo-ovariite, endométrite, cervicite, colpite, vaginite et vaginose chez les femmes.

La bactérie pathogène se trouve dans le corps d'un adulte sur deux qui est sexuellement actif, mais les signes de maladie ne sont pas inhérents à tout le monde. Par conséquent, les analyses de cette microflore sont quantitatives, montrant non seulement la présence d'une infection, mais également son titre, qui est un indicateur du risque de développer la maladie.

Ces méthodes de recherche sont le frottis, la PCR et l'ELISA. La différence entre ces derniers est une orientation non pas vers la bactérie elle-même, mais vers les classes anticorps IgG et IgA dans le sérum.

Après avoir reçu les résultats après ELISA, vous pouvez facilement déterminer s'il existe un risque de développer la maladie avant même de consulter le médecin. Les anticorps sont interprétés dans un titre de 1 à 5 à un à 80.

Décodage:



Autrement dit, les titres de 5, 10, 20 ne nécessitent pas de traitement et les titres 20 + symptômes d'inflammation, 40 et 80 - nécessitent une utilisation antibiotiques.

Ureaplasma 10 au 5ème degré
L'uréeplasmose est maladie infectieusecausée par les bactéries ureaplasma urealiticum et parvum, soumises à un haut degré de concentration ... Dans la syphilis primaire, l'écoulement du chancre solide ou ponctué des ganglions lymphatiques est examiné pour un tréponème pâle. En cas de syphilis secondaire, le matériau est prélevé sur la surface des papules érodées sur la peau, les muqueuses, sur les fissures, etc. chlorure de sodium ou prescrire des lotions contenant la même solution. La surface nettoyée est séchée avec un tampon sec et une boucle ou une spatule en platine irrite légèrement les zones périphériques, tout en pressant légèrement la base de l'élément avec les doigts dans un gant en caoutchouc jusqu'à ce qu'un fluide tissulaire (sérum) apparaisse, à partir duquel la préparation pour la recherche est préparée. Recevoir du liquide interstitiel est important pour le diagnostic de la syphilis, car les tréponèmes pâles sont situés dans les lumières des capillaires lymphatiques, dans les espaces tissulaires autour des vaisseaux lymphatiques et sanguins.

Ponction des ganglions lymphatiques régionaux

La peau au-dessus des ganglions lymphatiques est traitée avec une solution d'alcool à 96% et d'iode à 3-5%. Ensuite, 1 et 2 doigts de la main gauche fixent le ganglion lymphatique. Avec la main droite, prenez une seringue stérile avec quelques gouttes de solution de chlorure de sodium isotonique, qui est injectée parallèlement à l'axe longitudinal du ganglion lymphatique. L'aiguille est poussée dans différentes directions vers la paroi opposée de la capsule d'assemblage et le contenu de la seringue est injecté lentement. Le ganglion lymphatique est légèrement massé avec les doigts de la main gauche. Avec un retrait lent de l'aiguille, le piston de la seringue est simultanément étendu, aspirant le contenu du ganglion lymphatique. Le matériau est appliqué sur une lame de verre (avec une petite quantité de matériau, une goutte de solution de chlorure de sodium isotonique est ajoutée), recouverte d'un couvercle en verre. L'étude de la préparation native est réalisée dans un champ de vision sombre à l'aide d'un microscope optique à lumière avec un condenseur à fond noir (objectif 40, 7x, 10x ou 15x). Des tréponèmes pâles peuvent également être trouvés dans les préparations colorées. Lorsqu'ils sont colorés selon Romanovsky-Giemsa, les tréponèmes pâles deviennent roses, selon Fontan et Morozov, brun (noir); selon la méthode de Burri, les tréponèmes non colorés sont révélés sur un fond sombre.

Diagnostic sérologique

Les réactions sérologiques standard (classiques) et spécifiques sont d'une grande importance dans le diagnostic de la syphilis, dans l'évaluation de l'efficacité du traitement, dans l'établissement d'un critère de guérison, dans l'identification des formes cachées et résistantes. Les tests sérologiques standard ou classiques (CSR) comprennent:
• Réaction de Wasserman (RV),
• réactions sédimentaires de Kahn et Sachs-Vitebsk (cytocholiques),
• réaction sur verre (méthode express),
à spécifique:
• la réaction d'immobilisation des tréponèmes pâles (RIBT),
• réaction d'immunofluorescence (RIF).

Réaction de Wasserman (RV)

- développé par A. Wasserman avec A. Neisser et C. Bruck en 1906. La réaction de Wasserman est basée sur le phénomène de liaison du complément (réaction de Bordet-Zhangu) et permet la détection d'anticorps anti-lipidiques (réactifs). Selon les concepts modernes, les anticorps contre les lipides d'un macroorganisme sont déterminés dans la réaction de Wasserman, et non dans le tréponème pâle, et la réaction révèle un processus auto-immun, qui est causé par la dénaturation des tréponèmes pâles des tissus d'un macro-organisme avec la formation d'un complexe lipoprotéique (conjugué), dans lequel les lipides (haptènes) sont le déterminant.

Habituellement, le RV est administré avec deux ou trois antigènes. Les plus couramment utilisés sont l'antigène cardiolipine hautement sensible (extrait de cœur de bovin enrichi en cholestérol et lécithine) et l'antigène tréponémique (suspension traitée par ultrasons de tréponèmes culturels anatogènes pâles). Avec les réactifs du sérum sanguin du patient, ces antigènes forment un complexe immunitaire capable d'adsorber et de se lier au complément. Pour déterminer visuellement le complexe formé (réactifs + antigène + complément), un système hémolytique (un mélange d'érythrocytes de mouton avec du sérum hémolytique) est utilisé comme indicateur. Si le complément est lié dans la phase 1 de la réaction (réactifs + antigène + complément), l'hémolyse ne se produit pas - les érythrocytes précipitent dans un sédiment facilement perceptible (PB positif). Si en phase 1 le complément n'est pas lié en raison de l'absence de réactifs dans le sérum testé, il sera utilisé par le système hémolytique et une hémolyse se produira (PB négatif). La sévérité de l'hémolyse dans le contexte du RV est évaluée par les avantages: absence totale d'hémolyse ++++ ou 4+ (RV est nettement positive); hémolyse à peine commencée +++ ou 3+ (PB positif); hémolyse importante ++ ou 2+ (PB est faiblement positif); image incompréhensible de l'hémolyse ± (PB est douteux); hémolyse complète - (réaction négative de Wasserman).

En plus de l'évaluation qualitative du RV, il existe une formulation quantitative avec différentes dilutions de sérum (1:10, 1:20, 1:80, 1: 160, 1: 320). Le titre des réactifs est déterminé par la dilution maximale, ce qui donne toujours un résultat nettement positif (4+). Le réglage quantitatif du RV est important dans le diagnostic de certains formes cliniques infection syphilitique, ainsi que lors de la surveillance de l'efficacité du traitement. Actuellement, la réaction de Wasserman est posée avec deux antigènes (la cardiolipine et la souche de Reiter à son tréponème). En règle générale, le RV devient positif 5 à 6 semaines après l'infection chez 25 à 60% des patients, 7 à 8 semaines - 75 à 96%, 9 à 19 semaines - 100%, bien que ces dernières années, parfois tôt ou tard ... Dans le même temps, le titre des réactifs augmente progressivement et atteint une valeur maximale (1: 160-1: 320 et plus) en cas d'apparition d'éruptions cutanées généralisées (syphilis fraîche secondaire). Lorsque le RV est positif, un diagnostic de syphilis séropositive primaire est posé.
Avec frais secondaire et la syphilis récurrente secondaire, la RV est positive chez 100% des patients, mais chez les patients sous-alimentés avec une immunité affaiblie, un résultat négatif peut être observé. Par la suite, le titre des réactifs diminue progressivement et avec la syphilis récurrente secondaire ne dépasse généralement pas 1: 80-1: 120.
Avec syphilis tertiaire Le RV est positif chez 65 à 70% des patients et il y a généralement un faible titre de réactifs (1: 20-1: 40). Avec les formes tardives de syphilis (syphilis des organes internes, système nerveux) un RV positif est observé dans 50 à 80% des cas. Le titre des réactifs varie de 1: 5 à 1: 320.
Avec syphilis latente Un RV positif est observé chez 100% des patients. Le titre des réactifs est de 1:80 à 1: 640, et dans la syphilis latente tardive de 1:10 à 1:20. Une diminution rapide du titre des réactifs (jusqu'à une négativité totale) pendant le traitement indique l'efficacité du traitement.

Inconvénients de la réaction de Wasserman - sensibilité insuffisante (en stade initial la syphilis primaire est négative). Il est également négatif chez 1/3 des patients s'ils ont été traités par antibiotiques dans le passé, chez les patients atteints de syphilis tertiaire active avec des lésions de la peau et des muqueuses, de l'appareil ostéo-articulaire, des organes internes, du système nerveux central, avec une syphilis congénitale tardive.
Manque de spécificité - La réaction de Wasserman peut être positive chez les personnes qui n'ont jamais été malades ou qui ont la syphilis. En particulier, des résultats faussement positifs (non spécifiques) de RV sont observés chez des patients souffrant de lupus érythémateux disséminé, de lèpre, de paludisme, de néoplasmes malins, de lésions hépatiques, d'infarctus du myocarde étendu et d'autres maladies, et parfois chez des personnes en parfaite santé.
Une réaction de Wasserman faussement positive à court terme est détectée chez certaines femmes avant ou après l'accouchement, chez les toxicomanes, après anesthésie, consommation d'alcool. En règle générale, les faux positifs RV sont faiblement exprimés, le plus souvent avec un faible titre de réactifs (1: 5-1: 20), positifs (3+) ou faiblement positifs (2+). Dans les examens sérologiques de masse, la fréquence des résultats faux positifs est de 0,1 à 0,15%. Pour pallier le manque de sensibilité, ils utilisent la mise au froid (réaction du collier) et en même temps elle est mise en scène avec d'autres réactions sérologiques.

Réactions sédimentaires de Kahn et Sachs-Vitebsky

La réaction de Wasserman est utilisée en combinaison avec deux réactions sédimentaires (Kahn et Sachsa-Vitebsky), une fois échelonnés, des antigènes plus concentrés sont préparés. Méthode express (microréaction sur verre) - fait référence aux réactions lipidiques et est basée sur une réaction de précipitation. Il est placé avec un antigène cardiolipique spécifique, dont 1 goutte est mélangée avec 2-3 gouttes de sérum sanguin à tester dans les puits d'une plaque de verre spéciale.
Avantage - la vitesse de réception d'une réponse (après 30 à 40 minutes). Les résultats sont jugés par la quantité de précipitation et la taille des flocons. La gravité est définie comme DAC - 4+, 3+, 2+ et négatif. Il convient de noter que les faux positifs sont plus fréquents qu'avec RV. En règle générale, la méthode express est utilisée pour les dépistages de masse de la syphilis, lors de l'examen dans les laboratoires de diagnostic clinique, les services somatiques et les hôpitaux. Sur la base des résultats de la méthode express, le diagnostic de la syphilis est interdit, son utilisation chez les femmes enceintes, les donneurs, ainsi que pour le contrôle après le traitement est exclue.

Réaction d'immobilisation de Treponema pallidum (RIBT)

Réaction d'immobilisation de Treponema pallidum (RIBT)- proposé en 1949 par R.W. Nelson et M.Mayer. C'est le test de diagnostic le plus spécifique pour la syphilis. Cependant, la complexité et le coût élevé du réglage limitent son application. Dans le sérum sanguin des patients, des anticorps vidéo-spécifiques (immobilizines) sont déterminés, ce qui conduit à l'immobilité des tréponèmes pâles en présence de complément. L'antigène est un tréponème pâle pathogène vivant sécrété par des lapins infectés par la syphilis. À l'aide d'un microscope, les tréponèmes pâles ayant perdu leur mobilité (immobilisés) sont comptés et les résultats du RIBT sont évalués: immobilisation des tréponèmes pâles de 51 à 100% - positifs; de 31 à 50% - faiblement positif; de 21 à 30% - douteux; de 0 à 20% - négatif.
RIBT compte quand diagnostic différentiel pour différencier les réactions sérologiques faussement positives des réactions causées par la syphilis. Late devient positif que RV, RIF et donc pour le diagnostic des formes infectieuses de syphilis, il n'est pas utilisé, bien que dans la période secondaire de la syphilis, il est positif chez 85 à 100% des patients.
Dans la période tertiaire de la syphilis avec atteinte des organes internes, du système musculo-squelettique, du système nerveux, le RIBT est positif dans 98 à 100% des cas ( RV est souvent négatif).
Il faut rappeler que le RIBT peut s'avérer faux positif en présence de médicaments tréponémicides (pénicilline, tétracycline, macrolithes, etc.) dans le sérum étudié, qui provoquent une immobilisation non spécifique des tréponèmes pâles. À cette fin, le sang pour RIBT est examiné au plus tôt 2 semaines après la fin de la prise d'antibiotiques et d'autres médicaments.
Le RIBT ainsi que le RIF au cours du traitement sont lentement affectés négativement, ils ne sont donc pas utilisés comme contrôle au cours du traitement.

Réaction d'immunofluorescence (RIF)

Réaction d'immunofluorescence (RIF) - développé en 1954 par A. Coons et utilisé pour la première fois pour le diagnostic de l'infection syphilitique par Deacon, Falcone, Harris en 1957. Le RIF est basé sur une méthode indirecte de détermination des anticorps fluorescents. Les antigènes pour la stadification sont des tréponèmes pâles pathogènes tissulaires fixés sur des lames de verre sur lesquelles le sérum de test est appliqué. Si le sérum étudié contient des anticorps anti-tréponémiques liés aux IgM et IgG, ils se lient fermement à l'antigène - les tréponèmes, qui est détecté dans un microscope luminescent à l'aide d'un sérum fluorescent anti-espèce ("anti-humain").
Résultats RIF sont pris en compte par l'intensité de la luminescence des tréponèmes pâles dans la préparation (éclat jaune-vert). En l'absence d'anticorps anti-tréponémiques dans le sérum, les tréponèmes pâles ne sont pas détectés. En présence d'anticorps, la luminescence des tréponèmes pâles est révélée, dont le degré est exprimé en plus: 0 et 1+ - réaction négative; de 2+ à 4+ - positif.
RIF se réfère à des réactions tréponémiques de groupe et est mis dans une dilution du sérum de test 10 et 200 fois (RIF-10 et RIF-200). Le RIF-10 est considéré comme plus sensible, cependant, les résultats positifs non spécifiques tombent souvent que lorsque le RIF-200 est échelonné (il a une spécificité plus élevée). Habituellement, RIF devient positif plus tôt que RV - positif dans la syphilis séronégative primaire chez 80% des patients, chez 100% dans la période secondaire de la syphilis, toujours positif dans la syphilis latente et dans 95 à 100% des cas dans les formes tardives et la syphilis congénitale.
Spécificité RIF augmente après le traitement préliminaire du sérum étudié avec un antigène tréponémique sorbant-ultrasonique, qui se lie aux anticorps du groupe (RIF - abs).
Indications pour le réglage du RIBT et du RIF - diagnostic de la syphilis latente pour confirmer la spécificité d'un complexe de réactions lipidiques dans le cas de l'hypothèse d'une infection syphilitique sur la base d'un RV positif. Un RIBT et un RIF positifs sont des preuves de syphilis latente. Avec RV faux positif dans diverses maladies (lupus érythémateux systémique, néoplasmes malins et autres) et si les résultats répétés de RIBT et RIF sont négatifs, cela indique la nature non spécifique de RV. Suspicion de lésions syphilitiques tardives des organes internes, du système musculo-squelettique, du système nerveux en présence de RV négatif chez les patients. Suspicion de syphilis séronégative primaire, lorsque chez les patients ayant des études répétées de décharge d'érosion (ulcère) de la surface, avec des ganglions lymphatiques régionaux élargis, un tréponème pâle n'est pas détecté - dans ce cas, seul le RIF-10 est placé.
Lors de l'examen de personnes avec RV négatifqui ont eu des contacts sexuels et familiaux à long terme avec des patients atteints de syphilis, étant donné la possibilité probable de les traiter dans un passé récent avec des médicaments anti-syphilitiques qui ont causé un RV négatif. Test d'immunosorbant lié (ELISA, ELISA - test d'immunosorbant enzymelinked) - la méthode a été développée par E. Engvall et al., S. Avrames (1971). L'essence consiste en la combinaison de l'antigène syphilitique sorbé à la surface du support en phase solide avec l'anticorps du sérum sanguin analysé et la détection d'un complexe antigène-anticorps spécifique à l'aide d'un sérum sanguin immunitaire anti-espèce marqué par une enzyme. Ceci permet d'évaluer visuellement les résultats de l'ELISA par le degré de changement de la couleur du substrat sous l'action de l'enzyme incluse dans le conjugué. Des résultats ELISA inexacts peuvent survenir en raison d'une dilution insuffisante des ingrédients, d'une violation des régimes de température et de temps, d'une inadéquation des solutions de pH, de la contamination de la verrerie de laboratoire et d'une mauvaise technique de lavage du support.

Réaction d'hémagglutination passive (RPHA)

Proposé comme test de diagnostic de la syphilis par T. Rathlev (1965, 1967), T. Tomizawa (1966). La macromodification de la réaction est appelée TPNA, la micromodification est MNA-TP, la version automatisée est AMNA-TR et la réaction avec les macrocapsules de polyurée au lieu des érythrocytes est MCA-TP. La sensibilité et la spécificité du RPHA sont similaires à celles du RIBT, du RIF, mais le RPHA est moins sensible dans les formes précoces de la syphilis par rapport au RIF-abs et plus élevé dans les formes tardives, avec la syphilis congénitale. RPGA est mis en versions qualitatives et quantitatives.

Technique de prélèvement sanguin pour les tests sérologiques

Pour la recherche sur RV, RIF, RIBT, le sang est prélevé dans la veine cubitale à jeun ou au plus tôt 4 heures après un repas avec une seringue stérile ou une aiguille (par gravité). Sur le site de collecte, la peau est prétraitée avec de l'alcool à 70%. La seringue et l'aiguille doivent être rincées avec une solution isotonique de chlorure de sodium. 5-7 ml de sang de test sont versés dans un tube à essai propre, sec et froid. Un papier vierge est collé sur le tube à essai avec le nom du patient, les initiales, le numéro d'antécédents médicaux ou la carte ambulatoire, la date du prélèvement sanguin. Après la prise de sang, le tube à essai est placé au réfrigérateur avec un régime de température de + 4 ° + 8 ° C jusqu'au lendemain. Le lendemain, le sérum est drainé pour la recherche. Si le sang n'est pas utilisé le lendemain, le sérum doit être drainé du caillot et conservé au réfrigérateur pendant 1 semaine au maximum. Pour la recherche sur le RIBT, le tube doit être spécialement préparé et stérile. En cas de violation des règles de prélèvement de sang pour la recherche, le non-respect des conditions peut fausser les résultats.
Il n'est pas recommandé de prélever des échantillons de sang pour la recherche après avoir mangé, l'alcool, divers médicaments, après l'introduction de divers vaccins, pendant cycle menstruel chez les femmes.
Pour la recherche sur la méthode express, le sang a été prélevé du bout du doigt, comme cela se fait lorsqu'il est pris pour l'ESR, mais le sang est prélevé par 1 capillaire de plus. La méthode express peut également être réalisée avec du sérum sanguin obtenu par ponction veineuse. S'il devient nécessaire de tester le sang dans des laboratoires éloignés, du sérum sec peut être envoyé à la place du sang (méthode de la goutte sèche). Pour ce faire, le lendemain de la prise de sang, le sérum est séparé du caillot et aspiré dans une seringue stérile à raison de 1 ml. Puis le sérum est versé sous forme de 2 cercles séparés sur une bande de papier à lettres épais (papier ciré ou cellophane) mesurant 6x8 cm. Le nom, les initiales du sujet et la date du prélèvement sanguin sont inscrits sur le bord libre du papier. Protégez le papier avec du sérum de la lumière directe du soleil et laissez à température ambiante jusqu'au lendemain. Le sérum sèche sous la forme de petits cercles d'un film vitreux jaunâtre brillant. Après cela, des bandes de papier avec du sérum séché sont enroulées comme une poudre de pharmacie et envoyées au laboratoire, indiquant le diagnostic et dans quel but il est examiné.

Résistance sérologique

Chez certains (2% ou plus) patients atteints de syphilis, malgré le traitement anti-syphilitique à part entière, il y a un ralentissement (absence) de réactions sérologiques après la fin du traitement jusqu'à 12 mois ou plus. Il existe une soi-disant résistance sérologique, qui ces dernières années est devenue fréquemment observée. Il existe des formes de résistance sérologique:
• Vrai (absolu, inconditionnel) - il est nécessaire d'effectuer un traitement anti-syphilitique supplémentaire, associé à un traitement non spécifique pour augmenter les forces immunitaires du corps.
• Relatif - après un traitement complet, les tréponèmes pâles forment des kystes ou des formes L, qui sont dans le corps à un état faiblement virulent et, par conséquent, un traitement supplémentaire ne change pas les indicateurs de réactions sérologiques, en particulier RIF et RIBT.
Dans le même temps, des processus métaboliques insignifiants ont lieu dans les formes kystiques et les membranes des formes kystes sont une protéine étrangère (antigène). Pour se protéger, le corps produit des anticorps spécifiques, qui sont positifs ou fortement positifs lorsque les réactions sérologiques sont définies et qu'il n'y a pas de manifestations de la maladie. Avec les formes L, les processus métaboliques sont plus réduits et les propriétés antigéniques sont absentes ou légèrement exprimées. Les anticorps spécifiques ne sont pas produits ou sont en petites quantités, les tests sérologiques sont faiblement positifs ou négatifs. Plus la période de temps à partir du moment de l'infection est longue, plus le nombre de tréponèmes pâles est transformé en formes de survie (kystes, spores, formes L, grains), dans lesquelles le traitement antisyphilitique n'est pas efficace.

Pseudo-résistance - après le traitement, malgré des réactions sérologiques positives, le tréponème pâle dans le corps est absent. Il n'y a pas d'antigène dans le corps, mais la production d'anticorps se poursuit, qui sont enregistrés lorsque les réactions sérologiques sont définies.
Une résistance sérologique peut se développer en raison de:

• un traitement inadéquat sans égard à la prescription et au stade de la maladie;
• dose insuffisante et, en particulier, en raison de la non-prise en compte du poids corporel des patients;
• violation de l'intervalle entre l'administration de médicaments;
• la préservation des tréponèmes pâles dans l'organisme malgré le traitement spécifique à part entière, en raison de leur résistance à la pénicilline et aux autres agents de chimiothérapie en cas de présence de lésions cachées et encapsulées dans les organes internes, le système nerveux, ganglions lymphatiques, qui sont inaccessibles pour les médicaments antibactériens (souvent des tréponèmes pâles se trouvent dans les tissus cicatriciels plusieurs années après la fin du traitement, des tréponèmes pâles se trouvent parfois dans les ganglions lymphatiques 3-5 ans après le traitement anti-syphilitique);
• diminution des défenses dans diverses maladies et intoxications (endocrinopathies, alcoolisme, toxicomanie, etc.);
• épuisement général (manger des aliments pauvres en vitamines, protéines, graisses).
De plus, des réactions sérologiques faussement positives sont souvent détectées, non associées à la présence de syphilis chez les patients et causées par:
• maladies concomitantes non spécifiques des organes internes, troubles du système cardiovasculaire, rhumatismes, dysfonctionnements des systèmes endocrinien et nerveux, dermatoses chroniques sévères, néoplasmes malins;
• lésions du système nerveux (traumatisme grave, commotion cérébrale, traumatisme mental);
• grossesse; intoxication chronique à l'alcool, à la nicotine; maladies infectieuses (paludisme, tuberculose, hépatite virale, dysenterie, typhus, typhoïde et fièvre récurrente).
Ces facteurs peuvent affecter la réactivité immunologique du corps à la fois pendant la période de développement actif des manifestations syphilitiques et pendant leur régression.